胶体金检测技术
胶体金免疫检测技术是本世纪80年代发展起来的一项新技术。它是用胶体金颗粒标记抗原或抗体,进行抗体或抗原的检测或定位分析。
(一)原理
胶体金颗粒是将氯金酸(HAuCl4)用还原法(白磷、抗坏血酸、枸橼酸三钠等)制成的。它为带负电荷的疏水胶,其颗粒是单个散在的,根据需要可制成直径几纳米到几十纳米大小,呈桔红色。抗原或抗体蛋白质借助表面电荷,很容易包被到胶体金颗粒表面,形成标记颗粒,用于检测相应的抗体或抗原。
(二)试验类型
1.胶体金免疫凝集试验
具有试剂稳定、用量少、反应快、易于肉眼判定反应结果(红色)特点,优于红细胞凝集试验和乳胶凝集试验。
2.胶体金免疫光镜染色
用标记有抗体的胶体金颗粒与组织切片反应,在光学显微镜下观察胶体金颗粒的结合部位,可进行抗原定位分析。方法简便,与荧光抗体染色法的符合率达97%以上。
3.胶体金免疫电镜染色
电镜铜网制样上的病毒等抗原,加上抗体作用后,再与SPA包被的胶体金颗粒反应,在电镜下观察胶印体金结合部位,可用于抗原或抗体的检测。用抗体包被的胶体金颗粒处理超薄切片样品,在电镜下还可进行抗原的亚细胞水平定位分析。